Widefield Fluorescence-PTIR for sub-500nm IR mapping of cells and tissues

ビデオクレジット: Photothermal Spectroscopy Corp

蛍光標識、自己蛍光、IRタグ付き、またはラベルフリー実験

mIRage-LS と蛍光ベースの広視野 O-PTIR により、幅広い実験セットアップとサンプル タイプがサポートされます。ライフサイエンス測定のオプションは無限です。

サンプルが蛍光標識されているか、無標識か、自家蛍光であるか、または IR タグを持つ分子が検出されているかどうかにかかわらず、mIRage-LS は事実上すべての生物学的画像コントラスト強調ツールをサポートします。その結果、このシステムは、幅広いライフサイエンス研究に非常に柔軟な振動分光プラットフォームを提供します。

ラベルフリーの化学イメージング

蛍光標識が望ましくない実験や自己蛍光が存在しない実験では、サブ 500 nm O-PTIR により真のラベルフリー化学イメージングが可能になります。これは、タンパク質 (二次構造を含む)、核酸、脂質、炭水化物などの高分子を直接検出することで得られる固有の化学コントラストに依存しています。

分子特異性を高めるためのIRタグ

研究者がラベル付けによって提供される空間特異性をますます求めるようになっているため、IR タグの人気が高まっています。 IR タグは、研究者が望む空間特異性を提供する一方、その分子量とサイズが低いため、かさばる従来の蛍光標識で発生する可能性のある混乱を引き起こすことなく、小分子の代謝を追跡および研究することができます。

さまざまな方向での自家蛍光コラーゲン原線維の広視野 OPTIR 測定。 (A) 365 nm で励起したコラーゲン原線維の自己蛍光発光画像。 (BC) 1660 cm における FL-PTIR 吸収画像^-1と 1550cm^-1それぞれ。 (D) フィブリルに対して実質的に垂直(E)に配向されたIR放射線について示された関心領域からのIRハイパースペクトル画像スタックから抽出されたFL-PTIRスペクトル。 (サンプルはマニトバ大学の K Gough 教授から提供)。画像クレジット: Photothermal Spectroscopy Corp

もっと知りたいですか?お問い合わせはこちらから

自己蛍光サンプルのラベルフリー測定

自己蛍光: 研究者の新しい親友

これまで、ラマンや蛍光顕微鏡による振動分光法を使用する人々は、多くの場合、重大な干渉因子となる可能性がある不要なサンプルの自家蛍光を回避する必要がありました。 FL-PTIR を使用すると、自己蛍光が有効化要因および感度向上剤となり、多くの種類の生体サンプルにわたってラベルフリーの化学イメージングへの道が提供されます。

以下のビデオは、水中の生きた酵母細胞の広視野 O-PTIR イメージングを示しています。

• 1035 cm での IR 吸収^-1
• 生細胞インジケーターであるフルオレセインジアセテートを使用して蛍光標識
• 15 分間のダイナミクスの測定 (450 倍速): 画像あたり 2 秒

ビデオクレジット: Photothermal Spectroscopy Corp

高解像度かつ高品質の分光法と化学イメージング

上の珪藻画像: 1200/1072 cm での画像比率^-1 80cmで^-1 ピーク積分幅。緑色のボックスは、以下のスペクトルの計算に使用される 260 nm 2 × 2 ピクセル ROI のサイズを示します。破線は、断面測定のおおよその位置を示しています。画像クレジット: Photothermal Spectroscopy Corp

上記の IR スペクトルは、指定された位置の 260 nm の対象領域からのものです。 260 nm の長さスケールにわたる実質的なスペクトルの変化と、珪藻の殻の周期構造 (脈理) の交互領域におけるスペクトルの類似性の両方に注目してください。スペクトルは 1072 cm に正規化されています^-1。画像クレジット: Photothermal Spectroscopy Corp

500 nm 未満の空間分解能のデモンストレーション。上のプロットは 1260 cm の強度を示しています。^-1 IRバンドは白い破線に沿った単一ピクセルで測定されます。画像クレジット: Photothermal Spectroscopy Corp